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膜性囊泡（membrane vesicle）分成正常外向膜性囊泡（Right-side out；RSOV）和內(nèi)側(cè)外翻膜性囊泡（In-side out；IOV）。正常外向膜性囊泡是通過(guò)去除細(xì)胞漿內(nèi)容物，使之失去細(xì)內(nèi)在的代謝系統(tǒng)，同時(shí)保持質(zhì)膜的原始位相，有利于提供適合的底物，不會(huì)受到降解和代謝，建立動(dòng)力機(jī)制，進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)或攝入研究，例如微粒體組分用于V型ATP酶研究、線粒體組分用于F型ATP酶研究。而內(nèi)側(cè)外翻膜性囊泡是通過(guò)裂解細(xì)胞和細(xì)胞器后，質(zhì)膜重新閉合形成內(nèi)側(cè)面外翻的囊泡狀結(jié)構(gòu)，廣泛用于原發(fā)性轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的研究。 
 
產(chǎn)品內(nèi)容
 
HEPENGBIO清理液（Reagent A）    毫升
HEPENGBIO平衡液（Reagent B）    毫升
HEPENGBIO保存液（Reagent C）    毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
 
保存方式
 
保存HEPENGBIO保存液（Reagent C）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月
 
用戶自備
 
15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器
1.5毫升離心管：用于樣品操作和保存的容器
4℃超速離心機(jī)：用于分離膜性囊泡
DOUNCE勻漿器：用于裂解組織
 
實(shí)驗(yàn)步驟
 
一、正常外向膜性囊泡分離（線粒體和微粒體）
 
1． 準(zhǔn)備好新鮮的植物組織（葉片、谷粒、種子等），并秤重以確定1克組織重量 
2． （選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管
3． （選擇步驟）加入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent A）清洗1次
4． 移入一個(gè)液氮凍存管
5． 即刻放入液氮罐過(guò)夜
6． 次日從液氮罐里取出，即刻（最快速度）碾碎組織成粉末（注意：切莫使組織凍融）
7． 放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管
8． 加入xx毫升預(yù)冷的HEPENGBIO平衡液（Reagent B）
9． 渦旋震蕩5秒，充分混勻
10． 即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器
11． 在冰槽里用研磨棒勻化組織（約80下）
12． 將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管
13． 放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1000g
14． 小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管
15． 放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g
16． 小心移出上清液到2個(gè)新的1.5毫升離心管，同時(shí)保留沉淀顆粒
17． 加入xx微升HEPENGBIO保存液（Reagent C）到沉淀顆粒管――
18． 將含有上清液的2個(gè)1.5毫升離心管放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心60分鐘，速度為100000g
19． 小心抽去上清液
20． 分別加入xx微升HEPENGBIO保存液（Reagent C）――
21． 移取10微升進(jìn)行蛋白質(zhì)定量測(cè)定（注意：建議使用HEPENGBIO Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HEPENGBIO30030.1）
22． 即刻放進(jìn)－70℃冰箱里保存
 
二、內(nèi)側(cè)外翻膜性囊泡分離（質(zhì)膜分離）
 
1． 準(zhǔn)備好新鮮的植物組織（葉片、谷粒、種子等），并秤重以確定1克組織重量 
2． （選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管
3． （選擇步驟）加入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent A）清洗1次
4． 移入一個(gè)液氮凍存管
5． 即刻放入液氮罐過(guò)夜
6． 次日從液氮罐里取出，即刻（最快速度）碾碎組織成粉末（注意：切莫使組織凍融）
7． 放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管
8． 加入xx毫升預(yù)冷的HEPENGBIO平衡液（Reagent B）
9． 渦旋震蕩5秒，充分混勻
10． 即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器
11． 在冰槽里用研磨棒勻化組織（約80下）
12． 將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管
13． 放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1000g
14． 小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管
15． 放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心30分鐘，速度為10000g
16． 小心抽去上清液
17． 加入xx微升HEPENGBIO保存液（Reagent C）――
18． 連續(xù)－70℃至37℃凍融4次―― 
19． 移取10微升進(jìn)行蛋白質(zhì)定量測(cè)定（注意：建議使用HEPENGBIO Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒
20． 即刻放進(jìn)－70℃冰箱里保存
21． （選擇步驟）進(jìn)行IOV組分純化（建議使用HEPENGBIO IOV膜性囊泡高質(zhì)純化試劑盒